A). SEJARAH SALMONELLA
Widal merupakan suatu genus enterobakteria gram negatif yang berbentuk tongkat yang dapat menyebabkan tifus, paratifus dan penyakit foodborne.
Salmonella dinamai dari Daniel Edward Salmon ahli patologi Amerika walaupun sebenarnya rekannya Theobald Smith yang pertama kali menemukan bakterium tahun 1885 pada tubuh babi.
Untuk mendeteksi adanya bakteri ini dapat dilakukan dengan beberapa uji lab, seperti:
1. Uji Mikrobiologi
Seperti kultur gall, untuk mengetahui jenis salmonella.
2. Uji Serologi
Seperti Widal, untuk mengetahui antibodi terhadap antigen febrile salmonella.
3. Uji Biomolekuler ( PCR )
Seperti salmonella thypi pcr.
B). PERSIAPAN KERJA WIDAL TEST
1. Cara penyimpanan reagen
2. Kriteria sampel yang digunakan
3. Persyaratan alat pendukung
1. CARA PENYIMPANAN REAGEN
a. Reagen disimpan dilemari es suhu 2-8°C.
b. Simpan kembali reagen ke dalam lemari es jika tidak digunakan dalam jangka waktu yang lama.
c. Setelah dibuka reagen digunakan maksimal selama 3 bulan.
d. Pipet reagen harus selalu dalam keadaan kosong.
2. KRITERIA SAMPEL YANG DIGUNAKAN
a. Fresh serum.
b. Serum yang disimpan tidak boleh lebih dari 7 hari pada suhu 2-8°C.
c. Sampel serum harus bebas dari kontaminan, hemolisis, dan lipemik.
3. PERSYARATAN ALAT PENDUKUNG
a. Gunakan plate yang terbuat dari kaca dengan ukuran bulatan berdiameter ± 2 cm.
b. Gunakan mikropipet skala 10 - 100 dan mikropipet 5 ul yang terkalibrasi ( pemipetan dilakukan dengan disposible yellow tip).
c. Gunakan stik pengaduk sekali pakai pada saat menghomogenisasikan reagen dengan sampel.
d. Gunakan lampu duduk dengan leher yang bisa diatur rendah tingginya dan pastikan posisi mata tidak terkena langsung sinar lampu.
C). CARA KERJA
1. Keluarkan reagen dari lemari es dan biarkan pada suhu ruang ± 15 menit.
2. Cek pipet reagen dan keluarkan cairan yang ada di pipet reagen.
3. Homogenisasikan botol reagen dengan cara membolak balikkan sebanyak ± 5 kali sampai tidak ditemukan endapan pada dasar botol.
4. Homogenkan juga reagen dengan menggunakan pipet yang terdapat dalam masing masing botol reagen.
5. Siapkan plate yang bersih dan bebas lemak.
6. Dipipet 20 ul serum pada masing masing lingkaran plate.
7. Homogenkan kembali reagen dengan cara dibolak balikkan sebanyak ± 2 kali.
8. Dipipet 50 ul atau 1 tetes reagen Widal set pada masing masing lingkaran plate.
9. Homogenkan.
10. Putar slide dengan menggunakan tangan atau mechanical rotator di 100 rpm selama 1 menit.
11. Lakukan pembacaan hasil setelah 1 menit dan pembacaan tidak boleh lebih dari 1 menit.
12. Apabila terjadi hasil positif maka lakukan langkah pengenceran untuk mencari hasil titer sebagai berikut.
D). INTERPRETASI HASIL
1. Positif
- Warna dari larutan reaksi berubah.
- Terdapat butiran aglutinasi.
2. Negatif
- Warna dari larutan reaksi tidak berubah atau tetap sama dengan warna asal masing masing reagen.
- Tidak terdapat butiran aglutinasi.
