Hitung Jenis Leukosit & Morfologi Darah Tepi

PEMERIKSAAN SADT ( SEDIAAN APUSAN DARAH TEPI )

1). Tujuan Pemeriksaan Hematologi : 

1. Membantu menegakkan diagnosa.

2. Membuat diagnosis banding.

3. Memantau perjalanan penyakit.

4. Menilai beratnya sakit.

5. Menentukan prognosis ( cek ulang hasil ).

2). Bahan Pemeriksaan

Pemeriksaan dengan EDTA harus segera dilakukan bila terpaksa ditunda harus memerhatikan: 

3). Morfologi Darah Tepi

* Tujuan : 

• Menilai unsur sel darah tepi

-Eritrosit : kualitas

-Leukosit : kualitas & kuantitas

-Trombosit : kualitas & kuantitas

• Mencari adanya parasit 

-Malaria

-Tripanosoma

-Mikrofilaria

4). Bahan Pemeriksaan 

a. Darah kapiler / Vena

b. Darah EDTA

c. Pemeriksaan hema biasanya dipakai antikoagulan K3EDTA ( Kadar HB, hitung sel darah, retikulosit, LED, hematokrit & GDT )

d. Jumlah antikoagulan berlebih

• Eritrosit mengkerut : hematokrit rendah

• Trombosit membesar : disintegrasi 

e. Antikoagulan kurang : darah membeku

f. Untuk GDT ( Gambaran Darah Tepi ) : darah dengan EDTA jangan dipakai setelah lebih dari 1 jam.

5). Peralatan

• Kaca objek ukuran 25 X 75 mm

• Bersih & kering

• Dicuci dengan detergen dan dibilas dengan air, disimpan kering / dalam alkohol 95 %

• Sebelum dipakai kaca objek yang disimpan kering dihapus dengan alkohol kemudian dikeringkan.

• Batang gelas

• Rak kaca objek

• Pipet Pasteur

6). Cara Kerja

1. Pilih kaca objek yang rata untuk kaca penghapus.

2. Letakkan 1 tetes dari pada objek glass lain dorong hingga membentuk bagian yang tipis.

3. Tunggu hingga kering.

4. Letakkan sediaan hapus pada 2 batang gelas diatas bak tempat pewarnaan.

5. Fiksasi dengan metanol absolut selama 2 - 3 menit.

6. Genangi dengan zat warna giemsa selama 20 - 30 menit.

7. Bilas dengan air ledeng, mula² dengan aliran lambat kemudian lebih kuat.

8. Letakkan sediaan hapus dalam rak dalam posisi tegak & biarkan mengering.

9. Periksa dibawah mikroskop perbesaran 10 & 40 X.

7). Ciri² Sediaan Yang Baik

1. Sediaan tidak melebar sampai pinggir kaca objek. Panjangnya ½ - ⅔ panjang kaca.

2. Ada bagian yang cukup tipis. Eritrosit tidak bertumpuk & tidak membentuk rouleaux.

3. Sediaan tidak berlubang lubang / bergaris garis.

4. Penyebaran leukosit rata. Tidak dipinggir & ujung sediaan.

8. Mewarnai Sediaan Hapus 

Ikatan eosin Y pada azur B yang beragregasi menimbulkan warna ungu : efek rowanowsky giemsa.

9). Penilaian Eritrosit 

1. Size ( ukuran ), shape ( bentuk ) , & staining characteristic ( warna ).

2. Normal : 6 - 8 um ( ± = ukuran inti limfosit kecil ).

3. Lebih kecil : mikrosit

4. Lebih besar : makrosit